PCR en tiempo real en el cáncer de vesícula biliar

El ARN de tejidos se aísla, posteriormente se transcribe en ADNc mediante transcripción inversa  y la plantilla de ADNc utilizando el kit Primer-Script de RT-PCR de un paso  y el kit SYBR Premix Dimmer Eraser. La expresión génica se normalizó a la expresión de GADPH. Las secuencias de cebadores se enumeran de la siguiente manera: GAPDHF, 50 -CGGAGTCAACGGATTTGGTCGTAT-30, GAPDH-R, 50 -AGCCTTCTCCATGGTGGTGAAGAC-30; LncRNA AFAP1-AS1-F, 50 -AATGGTGGTAGGAGGGAGGAACAGG-30 y 50 -AATGGTGGTAGGAGGGAGGAACAGG-30 LncRNAAFAP1-AS1-R, 50 -AGAGTGTCCTCCTCCACCAA-30; Twist1- F, 50 -GGAGTCCGCAGTCTTACGAG-30, Twist1-R, 50 -CCAGCTTGAGGGTCTGAATC-30; E-cadherina, 50 -GAGTCC-cadherina, 50 -GAGTCC-cadherina, 50 -GAGTCC-cadherina, 50 -GAGTCC-cadherina, 50 -GAGTCC-cadherina- 30; Vimentina-F, 50 - AGATGGCCCTTGACATTGAG-30; Vimentina-R, 50 -CCAGAGGGAGTGAATCCAGA-30.

Se usa QRT-PCR para examinar el nivel de ARNm en casos de tejidos de cáncer de vesícula biliar y tejidos normales adyacentes. Para realizar el  RT-PCR en tiempo real se utiliza una máquina de PCR ABI7500 .

https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0753332216313452